图 1 表示的是岛津 ELSD-LT 的检测原理。 ELSD 的检验测试过程分①柱洗脱液的喷雾, ②流动相 的蒸发和③不挥发成分散射光的检测三步。柱洗 脱液在喷雾器中用氮或空气进行喷雾。然后进入 称为漂移管的温度调节管中,流动相蒸发去除, 只将不挥发成分送入检测器。在检测器用光照射 这些成分,它的散射光用光电倍增管进行仔细的检测。 图 2 是检测部的构造图。
没有 UV 吸收,也都能检测……这句话,想 起示差折光检测器(RID)。RID 是利用试样成分 与流动相的折射率的差进行仔细的检测,而通常由于它 们的折射率多少都有些差, 基本上什么都能检测。 然而,如果检测原理完全不同的 ELSD 与 RID 相 比较,会是怎样呢?
RID 上使用的流动相不受特殊的制约, 但是, ELSD 由于以流动相挥发为大前提, 限定为挥发性 物质。即,不可以使用磷酸缓冲液等。还有,由于 尘埃、不溶物,要注意,流动相中的杂质和柱填 充剂洗脱物等是产生噪声的原因。其中还有一 点……。RID 可在宽广的范围内取得直线性,而 ELSD 由于原理上物质量与散射强度成为指数关 系,必需采用双对计算使工作曲线线性化。
ELSD (Evaporative Light Scattering Detector) 是柱洗脱液进行喷雾,流动相溶剂蒸发,留下的 不挥发成分用光照射, 检测它的散射光的检测器。 也就是说,与流动相在一起但未蒸发的物质基本 上都可检测,因此称为「Universal Deteetor」。实 际上,这种 ELSD,早在 20 多年前已然浮现,但 由于存在灵敏度和稳定能力等难点, 未能广泛普及。 近年来,特别是由于药品部门的需求提高,经过 多次改良,性能也明显提高,再次受到注目。
ELSD 从过去就是用于 UV 检测困难的糖类和脂 质有关的分析,但最近,用作药品领域的杂质确 认受到注目。
前期,在「talk」和「Applications」上介绍 了蒸发光散射检测器,许多读者来信要求「进一 步介绍 ELSD」。这次,就 ELSD 进行谈话。
首先是灵敏度。利用糖类分析作比较时, ELSD 高 5-10 倍 S/N。其次,使用 RID 时易产生 烦恼的基线漂移。由于 RID 是检测流动相与试样 的极小的折射率差,流动相的折射率一定要经常固 定,处于稳定状态。但是由于折射率受微小的温 度变化和流量变化的影响,即使最新的装置在高 灵敏度分析时也很难取得笔直的基线。何况,梯 度洗脱还有许多意想不到的情况。而 ELSD 就没 有这些烦恼的事情。特别是适用于梯度洗脱,这 点是没有 UV 吸收的多成分分析中强有力的检测 手段。还有,使用 RID 在试样溶剂与流动相不同 时,有时它的溶剂峰会干扰目标成分的峰,但是, ELSD 没这个问题。